构建分泌型HBsAg单链抗体在毕赤酵母菌中的表达研究

• 作者: 任向荣 余宙耀 唐永红 李久香 熊盛 王一飞 粟宽源 罗勇
• 来源期刊: 上海免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 乙肝表面抗原 单链抗体 巴氏毕赤酵母 表达
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 168-172
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3289字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2003.03.007

摘要

为了从巴氏毕赤酵母中获得分泌表达的非融合人源抗HBsAg单链抗体(HBscFv),设计引物从pGEM-HBscFv上扩增HBscFv,亚克隆至P.pastoris表达载体pPICZαA中,然后转化P.pastoris GS115、KM71,菌落PCR、高浓度Zeocin抗性筛选鉴定转化子,甲醇诱导目的蛋白表达并对其性质进行鉴定.结果发现,3%～5%的转化子具有2 000 mg/L Zeocin抗性;转化子诱导后,可以合成并分泌相对分子质量为32 000的HBscFv,表达量占酵母培养上清中总蛋白的22%;酵母表达产物可被针对大肠杆菌来源HBscFv的单克隆抗体特异性识别,并具有结合HBsAg活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	粟宽源	解放军458医院全军传染病中心	6	33	3.0	5.0
2	任向荣	解放军458医院全军传染病中心	5	33	3.0	5.0
3	余宙耀	解放军458医院全军传染病中心	6	34	3.0	5.0
4	唐永红	解放军458医院全军传染病中心	3	27	2.0	3.0