登革2型病毒NS5蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化

• 作者: 刘波 李劲松 王明连 王洁
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 登革病毒 NS5蛋白 原核表达 蛋白纯化 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 422-424,428
• 页数: 4页
• 分类号: R373.33
• 字数: 2638字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2003.06.008

摘要

目的:构建登革2型病毒(DEN-2)NS5表达体系,摸索适宜的诱导表达条件,克服大分子蛋白难以表达的瓶颈,获得DEN2-2 NS5(相对分子质量104×103)表达产物,为以后对其活性、抑制剂等方面的研究奠定基础.方法:自DEN-2感染组织提取总RNA,RT-PCR扩增NS5基因片段(2.7kb),插入质粒pQE30,转化XL1Blue大肠杆菌得表达菌株XL1Blue/QENS5.同时优化诱导表达和目的蛋白的纯化条件.结果:表达菌株XL1Blue/QENS5增菌培养后更换新的培养基,在一定温度范围条件下诱导可以表达出最高占菌体总蛋白22.8%的NS5蛋白,在较低温度下诱导目的蛋白能以可溶性形式表达,经过纯化后的NS5蛋白纯度可达90%以上.结论:在国内首次实现了DEN-2 NS5蛋白的表达,获得的诱导表达条件可能对于其他大分子蛋白的表达有一定的借鉴意义.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王明连	军事医学科学院微生物流行病研究所	2	9	2.0	2.0
2	李劲松	军事医学科学院微生物流行病研究所	43	326	12.0	16.0
3	刘波	军事医学科学院微生物流行病研究所	32	100	6.0	9.0
4	王洁	军事医学科学院微生物流行病研究所	23	197	5.0	14.0