人血管内皮生长因子165基因真核表达载体的构建及表达

• 作者: 杨连甲 董绍忠 陈希哲 陈琰 高全文
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 真核表达载体 骨髓基质细胞
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 32-34
• 页数: 3页
• 分类号: R543
• 字数: 2941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2003.01.011

摘要

目的: 构建人血管内皮生长因子165(hVEGF165)的真核表达载体, 并在大鼠骨髓基质细胞中进行表达.方法: 利用基因克隆技术, 将原核克隆载体pSP73中的目的基因VEGF165用BamH I和Xho I双酶切后, 再克隆到真核表达载体pcDNA3.1中, 构建重组质粒pcDNA3.1-VEGF165.对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定.通过脂质体介导, 用重组质粒转染SD大鼠骨髓基质细胞, 然后以G418筛选阳性克隆, 用免疫细胞化学鉴定. 结果: 经酶切鉴定及基因测序证实, 重组体中已插入目的基因片段VEGF165.免疫细胞化学证实, 重组质粒转染的骨髓基质细胞中有VEGF165基因的表达.结论: 成功地构建真核表达载体pcDNA3.1-VEGF165, 并在骨髓基质细胞中得到表达, 为将表达VEGF基因的骨髓基质细胞作为骨组织工程的种子细胞的可能性提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	董绍忠	第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室	52	257	9.0	13.0
2	陈希哲	第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室	7	108	6.0	7.0
3	杨连甲	第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室	78	485	10.0	17.0
4	高全文	第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室	4	23	3.0	4.0
5	陈琰	第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室	2	7	1.0	2.0