胡萝卜抗冻蛋白在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 何炎明 刘兵 张党权 王金发 范云
• 来源期刊: 中山大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 胡萝卜Daucus carota var. sativa 抗冻蛋白 表达 包涵体 诱导 复性
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 页码范围: 51-55
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4641字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-6579.2003.03.014

摘要

以pET-11a为载体构建了胡萝卜抗冻蛋白非融合表达的重组质粒,并在大肠杆菌菌株BL21(DE3, pLysS)中成功地进行了高效表达.表达的蛋白质以包涵体的形式存在,相对分子质量为36 800.经正交试验得到了优化的诱导表达条件.包涵体经各种缓冲液洗涤纯化、溶解、复性和超滤浓缩后,经SDS-PAGE电泳检测,纯度达单一带水平.生物学活性研究表明,重组表达的胡萝卜抗冻蛋白具有很强的热滞活性和提高细菌耐寒性的作用.