人BAFF cDNA的克隆及原核表达载体的构建

• 作者: 何凤田 周度金 唐蓓 彭家和 李蓉芬 陈敏 陈珊 高会广
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: BAFF RT-PCR 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2003,（6）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 498-500
• 页数: 3页
• 分类号: R394-33|R394.3
• 字数: 1711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2003.06.012

摘要

目的克隆人BAFF(B cell activating factor belonging to the TNF family)全长及128～285片段的cDNA并构建其原核表达载体,为表达和检测其生物学活性做准备. 方法提取HL-60细胞总RNA,经RT-PCR扩增编码人BAFF全长及128～285氨基酸残基的cDNA序列,并将其克隆至载体pUC18和pUC19进行序列测定,然后构建于新型原核表达载体pQE-80L中.结果 RT-PCR扩增得到了858 bp和477 bp的DNA片段,序列分析与GenBank 中报道的编码BAFF全长及128～285氨基酸残基的cDNA序列完全一致.结论 BAFF cDNA的克隆及其原核表达载体的构建,为进一步表达和检测其生物学活性奠定了基础.