AngRem104基因与绿色荧光蛋白融合基因表达载体的构建及在COS-1细胞中的表达定位

• 作者: 周安宇 张宏 梁秀彬 王海燕
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 生物学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 基因表达
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 30-34
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3246字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6325.2003.01.007

摘要

构建以绿色荧光蛋白(Green fluorescence protein,GFP)为报告基因的重组表达质粒AngRem104-pEGFP-N1,利用脂质体转染体外培养的COS-1细胞,在活细胞状态下用荧光显微镜直接观察AngRem104-EGFP融合蛋白在细胞中的分布和定位,用RT-PCR和Western blot方法验证其mRNA和蛋白的表达.结果表明在空载体pEGFP-N1转染组中,COS-1细胞内绿色荧光呈弥散分布;重组质粒AngRem104-pEGFP-N1转染组中,绿色荧光集中在细胞核中,随着表达量的增高,绿色荧光在细胞核中聚集成团块状、颗粒状.RT-PCR的结果表明AngRem104在重组质粒转染组中的表达明显高于空载体和空白对照组.Western blot的结果也确证了AngRem104-EGFP融合蛋白的表达.提示新基因AngRem104/pEGFP融合基因真核表达载体在真核细胞COS-1中获得了表达,细胞所表达的融合蛋白具有AngRem104和EGFP的双重活性,可用荧光显微镜直接观察其表达情况及亚细胞定位,为基因功能研究提供了线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张宏	北京大学第一医院肾内科肾脏病研究所	54	207	9.0	11.0
2	王海燕	北京大学第一医院肾内科肾脏病研究所	197	3910	32.0	55.0
3	周安宇	北京大学第一医院肾内科肾脏病研究所	4	34	4.0	4.0
4	梁秀彬	北京大学第一医院肾内科肾脏病研究所	3	25	2.0	3.0