用FQ-PCR方法快速检测水产品中副溶血弧菌

• 作者: 焦红 王伟毅 王方金 程刚 翁文川 谢钧宪
• 来源期刊: 检验检疫科学
• 学科: 医学
• 关键词: 荧光定量PCR 副溶血弧菌 定量检测试剂盒
• 年，卷（期）: 2004,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 40-43
• 页数: 4页
• 分类号: R1
• 字数: 3361字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5354.2004.06.016

摘要

[目的]采用荧光定量PCR技术,研制适合各层次实验室使用的,快速、准确地检测与鉴定食品中副溶血弧菌污染的定性、定量检测试剂盒.[方法]根据副溶血弧菌gyrase基因序列,设计并合成特异性引物和荧光标记探针,将扩增后的特异片断制成阳性模板,绘制标准曲线.以副溶血弧菌菌株8株及同源及非同源参考菌株24株,做特异性检测;将阳性污染菌按梯度加入阴性样品为模拟样本,做敏感性检测.同时使用PE7000型定量PCR仪和国产DA620微量荧光检测仪检测.[结果]该方法有良好的特异性:8株副溶血弧菌结果均为阳性,而其他24株菌株均为阴性(其中8株是弧菌科,其它15株分别来自不同的菌属);该方法有良好的敏感性:阳性模板浓度与定量曲线循环阈值之间具有良好的线性关系,相关系数达到0.9871.直接进行定量检测,则检测低限在102cfu/g;经过24小时增菌培养,检测低限可达2cfu/g.[结论]该方法特异性强、敏感性高,操作简便快速,能避免常规PCR方法易污染的缺陷,在国产仪器上测试同样取得较好的敏感性和特异性,便于基层实验室使用,具有很好的推广应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	焦红		24	120	6.0	10.0
2	王伟毅	中山大学达安诊断中心	9	87	5.0	9.0
3	程刚		2	18	1.0	2.0
4	王方金		3	18	1.0	3.0
5	翁文川	中山大学达安诊断中心	1	18	1.0	1.0
6	谢钧宪	中山大学达安诊断中心	1	18	1.0	1.0