来源于Escherichia coli的高比活植酸酶基因的高效表达

• 作者: 伍宁丰 史秀云 姚斌 王亚茹 罗会颖 范云六 袁铁铮
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 高比活植酸酶 基因改造 毕赤酵母 高效表达
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 酶工程
• 页码范围: 78-84
• 页数: 7页
• 分类号: Q814
• 字数: 6566字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2004.01.017

摘要

高效表达高比活植酸酶是进一步提高植酸酶发酵效价、降低植酸酶生产成本的一个有效途径.对源于Escherichia coli的高比活植酸酶基因appA,按照毕赤酵母(Pichia pastoris)密码子的偏爱进行了密码子优化改造.该改造后的基因appA-m按正确的阅读框架融合到毕赤酵母表达载体pPIC9上的α-因子信号肽编码序列3′端,通过电击转化得到重组转化子.对重组毕赤酵母的Southern blotting分析证实植酸酶基因已整合到酵母基因组中,并确定了整合基因的拷贝数.Northern blotting分析证实植酸酶基因得到了正常转录.SDS-PAGE分析和表达产物的研究表明,植酸酶得到了高效分泌表达,在5L发酵罐中植酸酶蛋白表达量达到2.5mg/mL发酵液, 酶活性(发酵效价)达到7.5×106IU/mL发酵液以上, 大大高于目前报道的各种植酸酶基因工程菌株的发酵效价.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	伍宁丰	中国农业科学院生物技术研究所	56	1134	18.0	33.0
3	范云六	中国农业科学院生物技术研究所	74	2436	27.0	48.0
4	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
5	王亚茹	中国农业科学院饲料研究所	30	682	17.0	25.0
6	袁铁铮	中国农业科学院饲料研究所	18	500	13.0	18.0
7	史秀云	中国农业科学院饲料研究所	7	306	6.0	7.0