幽门螺杆菌鞭毛蛋白B亚单位原核表达系统的构建及其产物的免疫性

• 作者: 严杰 孙爱华 邵浙新
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 幽门螺杆菌 flaB基因 表达载体 免疫学效果
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 193-195,213
• 页数: 4页
• 分类号: Q93
• 字数: 1703字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2004.04.001

摘要

目的构建幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)鞭毛蛋白B亚单位(flaB)原核表达系统,并鉴定其表达产物的免疫性.方法采用PCR从幽门螺杆菌基因组DNA中扩增全长flaB基因,T-A克隆后测定核苷酸序列,构建pET32a-flaB表达载体,以E.coliBL21DE3为表达宿主菌,用SDS-PAGE检测重组蛋白(rFlaB)的表达水平.采用Hp全菌抗体的Westem blot和兔抗rFlaB血清的免疫扩散试验鉴定其免疫反应性和抗原性.结果所克隆的flaB基因与文献报道的核苷酸序列同源性为96.31%～97.73%,氨基酸序列同源性高达99.41%～100%.构建的原核表达系统pET32a-flaB-E.coliBL21DE3的rFlaB产量为细菌总蛋白的40%左右.Hp全菌抗体能识别rFlaB.rFlaB免疫家兔能获得高效价血清抗体.结论已成功地构建了Hp flaB高效原核表达系统,所表达的rFlaB有良好的免疫反应性和抗原性,可作为Hp疫苗的候选抗原.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	严杰	浙江大学医学院	265	1149	14.0	20.0
2	孙爱华	浙江省医学高等专科学校医学检验系	7	37	3.0	6.0
3	邵浙新	浙江大学医学院	22	78	6.0	7.0