RAP结合肽-hFcγ1融合蛋白的表达与初步活性鉴定

• 作者: 丁红梅 李少华 李洁 杨光 柳川 沈倍奋 邵宁生
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: RAP 结合肽 融合蛋白 金黄色葡萄球菌 毒素
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 239-241,244
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|R378.11
• 字数: 3997字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.03.012

摘要

目的:将肽库筛选到的正调控金黄色葡萄球菌(金葡菌)外毒素分泌的关键分子RAP(RNA Ⅲ activating protein)的结合肽与人IgG1抗体Fc片段(hFcγ1)融合表达,检测其干扰金葡菌外分泌毒素产生的活性.方法:根据噬菌体肽库筛选到的RAP结合肽序列,选用大肠杆菌偏爱的密码子合成基因片段,将其融合在人IgG1抗体Fc片段基因序列的5′端,构建pET-rapbp-fc融合表达载体,转化大肠杆菌并诱导表达.以包涵体形式存在的目的蛋白经变性、复性后,ELISA实验分别证实其与抗人IgG抗体及纯化RAP的结合活性.以MDBK细胞株为模型,MTT实验观察融合蛋白对金葡菌196菌株外分泌毒素水平的影响.结果与结论:融合基因在大肠杆菌中获得表达.复性后,融合蛋白的Fc片段及结合肽部分分别能够与抗人IgG抗体及RAP结合,且能在一定程度上降低金葡菌196株上清中的毒素水平.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨光	军事医学科学院基础医学研究所	44	152	7.0	9.0
2	李少华	军事医学科学院基础医学研究所	20	90	4.0	9.0
3	柳川	军事医学科学院基础医学研究所	23	81	5.0	8.0
4	沈倍奋	军事医学科学院基础医学研究所	213	1497	18.0	31.0
5	邵宁生	军事医学科学院基础医学研究所	79	523	11.0	20.0
6	丁红梅	军事医学科学院基础医学研究所	22	48	4.0	5.0
7	李洁	军事医学科学院基础医学研究所	9	55	3.0	7.0