一种新的猪α-干扰素基因克隆及其在大肠杆菌中表达

• 作者: 张素芳 曹瑞兵 王艳 蔡梅红 陈德胜 陈溥言
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪α-干扰素 基因克隆 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 278-282
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 3653字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2004.03.008

摘要

提取经新城疫病毒诱导培养的猪外周血白细胞总RNA,RT-PCR扩增出猪α-干扰素基因并克隆到T载体.测序结果表明,扩增片段含有信号肽的猪α-干扰素完整基因,与GenBank上登录的猪α1-干扰素基因同源性为97.2%.亚克隆猪α-干扰素成熟蛋白编码基因并对其5'段前1个稀有密码子进行大肠杆菌(Escherchia coli)偏嗜性改造.构建了猪α-干扰素原核单纯表达载体pCIFNA,实现了猪α-干扰素在大肠杆菌中的表达,表达产物约占菌体总蛋白的15.6%.表达产物以包涵体形式存在,用含6 mol/L盐酸胍的变性液溶解及含GSH-GSSG复性液复性处理,复性后的表达产物经凝胶层析纯化后,细胞病变抑制法测定结果表明,重组猪α-干扰素具有较高抗病毒活性,约为1.66x106U/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	269	2875	28.0	40.0
2	曹瑞兵	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	71	897	19.0	28.0
3	张素芳	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	14	296	7.0	14.0
4	陈德胜	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	34	786	14.0	27.0
5	王艳	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	27	496	10.0	22.0
6	蔡梅红	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	5	148	4.0	5.0