人乳头瘤病毒6b亚型L1重组质粒的构建及免疫原性分析

• 作者: 刘方 刘跃华 左亚刚 朱铁山 王家璧 马东来
• 来源期刊: 临床皮肤科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 尖锐湿疣 乳头瘤病毒,人 疫苗,DNA 真核表达
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 69-72
• 页数: 4页
• 分类号: R730.261|R392.12
• 字数: 3128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4963.2004.02.002

摘要

目的:构建人乳头瘤病毒(HPV)6b亚型L1的重组质粒,并了解其对小鼠的免疫原性.方法:将HPV6b的L1基因插入真核表达载体pcDNA3.1中,构建L1的重组质粒;鉴定后转染COS-7细胞,并用免疫印迹法进行表达分析;18只BALB/c雌性小鼠用作重组质粒的免疫原性检测.结果:重组质粒可被内切酶EcoRI和BamHI切开,测序发现插入片段与L1基因一致;转染24 h后十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及免疫印迹出现了阳性条带;经pcDNA3.1-HPV6b L1免疫的小鼠可测到L1抗体(滴度为1:100),IL-4水平明显升高.结论:HPV6b L1的重组质粒构建成功,能在真核细胞内表达,并能有效激发小鼠产生体液免疫和细胞免疫.