丙型肝炎病毒E1E2蛋白原核表达载体的构建及表达产物的鉴定

• 作者: 刘秋平 李光玉 杜德伟 潘蕾 贾战生 魏欣
• 来源期刊: 西北国防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 丙型肝炎病毒 包膜糖蛋白 载体构建 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 161-163
• 页数: 3页
• 分类号: R512.6
• 字数: 2492字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-8622.2004.03.001

摘要

目的:构建丙型肝炎病毒(HCV)包膜糖蛋白(E1E2)基因的原核表达载体,为研究HCV E1E2蛋白属性及基因免疫奠定基础.方法:设计HCV E1E2区基因上、下游引物,分别引入BglⅡ及EcoRI酶切位点,以含有HCV H株基因序列的质粒pBRTM/HCV1-3011为模板,通过PCR 扩增获得HCV E1E2区基因片段,将其克隆入原核表达载体pRSET A,然后通过酶切和序列测定对其进行鉴定;将此表达载体转化入表达菌BL21(DE3)pLySs诱导表达,并采用SDS-PAGE对表达产物进行鉴定.结果:经酶切及序列测定分析表明,成功地构建了重组原核表达载体pRSETA- HCV E1E2;SDS-PAGE显示目的蛋白大量表达,且呈非溶状态. 结论:HCV E1E2融合蛋白可以在大肠杆菌中大量表达,为HCV E1E2蛋白的制备及基因疫苗的研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杜德伟	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	49	308	10.0	15.0
2	潘蕾	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	67	277	9.0	13.0
3	贾战生	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	118	503	12.0	16.0
4	李光玉	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	52	183	8.0	10.0
5	魏欣	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	25	83	6.0	8.0
6	刘秋平	第四军医大学唐都医院全军感染病诊疗中心	4	9	2.0	2.0