单纯疱疹病毒2型抗原DNA的克隆及在大肠杆菌中的表达

• 作者: 张建 张彩 徐辉 游力 许晓群 魏海明
• 来源期刊: 中国麻风皮肤病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单纯疱疹病毒2型 克隆 表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 320-322
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 1829字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-1157.2004.04.005

摘要

目的:在大肠杆菌中表达重组单纯疱疹病毒2型(HSV-2)抗原.方法:用PCR方法从单纯疱疹病毒中扩增HSV-2 DNA片段,约500bp,克隆到pMD18T载体并对克隆的DNA片段进行序列分析.用限制酶EcoRI和BamHI消化pMD18T/HSV-2重组质粒,分离HSV-2片段,并插入质粒表达载体pBV220的相应限制酶位点,酶谱分析鉴定重组表达载体pBV220/HSV-2.转化菌株经42℃诱导,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组蛋白.结果:PCR扩增的DNA片段与HSV-2的目的片段大小一致.重组质粒pMD18T/HSV-2的DNA序列分析显示克隆的DNA序列与文献报道的HSV-2 DNA序列一致.SDS-PAGE表明重组蛋白相对分子量为18000,表达量达菌体总蛋白的20%左右,Western blot分析显示重组蛋白能特异地与抗HSV-2抗体结合.结论:已成功构建了表达具有功能的重组HSV-2抗原的工程菌株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	游力	山东省医学科学院基础医学研究所	17	101	6.0	9.0
2	张建	山东省医学科学院基础医学研究所	15	220	7.0	14.0
3	许晓群	山东省医学科学院基础医学研究所	71	519	12.0	19.0
4	张彩	山东省医学科学院基础医学研究所	36	208	9.0	13.0
5	魏海明	中国科技大学生命学院免疫学研究所	7	37	4.0	6.0
6	徐辉		1	0	0.0	0.0