绿色荧光蛋白在大肠杆菌O157∶H7检测中的应用

• 作者: 刘秀梅 赵志晶
• 来源期刊: 中华预防医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 大肠杆菌O157 荧光抗体技术 生物学标记
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 196-199
• 页数: 4页
• 分类号: R378.21
• 字数: 3722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0253-9624.2004.03.015

摘要

目的将绿色荧光特征引入大肠杆菌E.coli O157∶H7,用于传统检测方法的改进及目的菌的应用研究. 方法将pGFP质粒转化E.coli O157∶H7,构建一种工程菌(E.coli O157∶H7- pGFP),并进行了选择性培养基的筛选.以E.coli O157∶H7- pGFP对鸡肉与牛奶等食品样品进行接种与回收试验,同时设定不同温度模拟食品储存的不同情况.结果 pGFP质粒可以在E.coli O157∶H7菌株中稳定存在.将E.coli O157∶H7-pGFP接种食品样品,以LBan培养基平板回收发现:较高温度存放肉类与牛奶,其污染的E.coli O157∶H7菌量可在12 h增加35 000～200 000倍,而4℃存放可以使污染菌量缓慢下降.结论构建了一种具有紫外灯下发出绿色荧光与氨苄青霉素抗性等特性的重组菌株--O157∶H7-pGFP,并设计了适合E.coli O157∶H7-pGFP生长的选择性培养基--LBan.该重组菌株可应用于检测方法的改进及该菌特性的研究,是一种非常有用的工程菌.