实时PCR在大肠杆菌O157:H7快速检测中的应用

• 作者: 卢亦愚 叶菊莲 张建华 程苏云 罗芸 陆群英
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 实时PCR Taqman探针 大肠杆菌O157:H7 检测
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 疾病防治
• 页码范围: 839-841,英文目录2
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2
• 字数: 3164字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2007.08.025

摘要

目的 建立一种快速、敏感、特异的大肠杆菌O157:H7的定量检测方法.方法 根据GenBank 公布的O157:H7大肠杆菌rfbE基因序列,应用分子生物学软件进行序列比对,在该基因的保守区设计引物和TaqMan 探针,对荧光定量PCR 反应条件进行优化,建立实时荧光定量PCR检测大肠杆菌O157:H7的反应体系,并对该法的特异性、敏感性和重复性进行了评价.结果 所有大肠杆菌O157:H7菌株的检测结果均为阳性,而所有其它菌株检测结果均为阴性;该方法检测的灵敏度可达1 cfu/μL,重复性检测的变异系数均小于5 %.在模拟污染牛奶中,可检出1 ×102 cfu/μL的细菌.从细菌核酸提取至完成检测约需3 h.结论 本研究建立的基于Taqman探针技术的实时PCR检测体系具有快速、灵敏度高、特异性强等优点,可用于大肠杆菌O157:H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	叶菊莲		50	250	9.0	12.0
2	罗芸		56	262	10.0	12.0
3	张建华	绍兴文理学院医学院	23	142	7.0	11.0
4	陆群英		55	297	10.0	13.0
5	程苏云		72	743	14.0	24.0
6	卢亦愚		127	1020	16.0	23.0