鹅细小病毒强毒PCR检测方法的建立

• 作者: 刘菲 周伟光 周毅 文明 汪铭书 王刚 程安春 贾仁勇 郭宇飞 陈孝跃 韩新峰 黄诚
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: PCR 检测方法 鹅细小病毒
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 54-60
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.2:Q503
• 字数: 6341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2004.09.012

摘要

参照GenBank中登录的鹅细小病毒(GPV)B株的全基因序列,针对GPV的VP3保守基因设计了1对引物,建立了GPV的PCR检测方法.采用该方法检测GPV能够扩增出预期大小约441bp的特异性片段,而对鸭瘟病毒(DPV)、鹅源致病性大肠埃希氏菌(E.coli)O8和O1、雏鹅新型病毒性肠炎病毒(NGVEV)呈阴性反应.该法检测GPV核酸的灵敏度可达0.47pg;对GPV强毒皮下注射感染雏鹅各器官的检测结果表明,感染后8h即可从心、肝病料中检出病毒DNA,感染后24h可从延髓、胸腺、胰腺、十二指肠、空肠、盲肠、腔上囊、心、肝、脾、肺、肾、血液、小脑、直肠、肌肉、粪便中检出GPV DNA,感染48 h后可从骨髓中检出病毒DNA,感染312h后仍能从十二指肠、空肠、盲肠、心、肝、肾、粪便中检出病毒DNA.病毒分离阳性的可疑病料PCR检测为阳性,对临床送检病料的检测结果表明,PCR的敏感性显著高于病毒分离.