携带IRES的BMP2绿色荧光蛋白表达载体的构建和表达

• 作者: 刘建伟 周亚莉 安洪 蒋电明 邹海波
• 来源期刊: 重庆医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 骨形态发生蛋白 绿色荧光蛋白 内部核糖体进入位点 真核表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 455-458
• 页数: 4页
• 分类号: R378.91+1
• 字数: 2868字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-3626.2004.04.014

摘要

目的:构建携带有BMP2基因的pIRES2绿色荧光蛋白表达载体,为BMP2在体内外表达及蛋白定位提供标记.方法:酶切pCDAN3.1-BMP2质粒,获得BMP2cDNA片段并亚克隆至pUC18载体上,随后用SalⅠ单酶切pUC18-BMP2,再次获得BMP2cDNA,同时用SalⅠ将载体pIRES2-EGFP线性化后去磷酸化修饰.连接二者构建重组质粒.酶切筛选阳性克隆并鉴定插入的方向.重组质粒转染细胞,用激光共聚焦显微镜、RT-PCR及流式细胞仪检测基因在细胞内的定位、表达及转染效率;结果:重组载体经酶切和测序证明构建正确,并在细胞中表达.结论:成功构建了pIRES2-BMP2-EGFP表达载体,为研究BMP2的细胞内定位提供了一个重要而方便的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安洪	重庆医科大学临床学院骨科	199	1520	18.0	29.0
2	蒋电明	重庆医科大学临床学院骨科	374	2452	23.0	33.0
3	邹海波	重庆医科大学临床学院骨科	6	59	5.0	6.0
4	刘建伟	重庆医科大学临床学院骨科	4	44	4.0	4.0
5	周亚莉	重庆医科大学检验系	4	85	4.0	4.0