TIMP-1绿色荧光蛋白真核表达载体的构建和鉴定

• 作者: 刘章锁 唐琳 张云汉 高冬玲
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: TIMP-1 绿色荧光蛋白 基因克隆 载体
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 系列研究
• 页码范围: 426-428
• 页数: 3页
• 分类号: R735.2
• 字数: 2309字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2006.03.013

摘要

目的:构建并鉴定TIMP-1绿色荧光蛋白真核表达载体.方法:提取胃癌组织总RNA,用TIMP-1基因引物进行RT-PCR,将扩增产物克隆至pGEM-T载体,PCR鉴定及测序证实后,BamH Ⅰ和HindⅢ双酶切pGEM-T-TIMP-1重组体,回收TIMP-1,再将其亚克隆到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C3中,并对阳性克隆进行酶切鉴定和测序分析.结果:构建的pEGFP-C3-TIMP-1表达载体分别作PCR及双酶切鉴定,证实其中有目的片段完整插入,插入片段测序结果与TIMP-1序列设计完全一致,将其转染人胃癌BGC-823细胞后,TIMP-1的表达定位在细胞胞浆内.结论:成功构建了TIMP-1绿色荧光蛋白真核表达载体,为TIMP-1的肿瘤靶向治疗研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张云汉	河南省肿瘤病理重点实验室郑州大学第一附属医院病理科	65	266	9.0	11.0
2	高冬玲	河南省肿瘤病理重点实验室郑州大学第一附属医院病理科	50	180	7.0	9.0
3	唐琳	河南省肿瘤病理重点实验室郑州大学第一附属医院病理科	46	135	5.0	9.0
5	刘章锁	郑州大学第一附属医院肾内科	260	1365	15.0	28.0