靶向增强绿色荧光蛋白shRNA的真核表达载体构建

• 作者: 包莉
• 来源期刊: 湖北民族学院学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 增强绿色荧光蛋白 小发夹RNA RNA干扰 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-6,封3
• 页数: 4页
• 分类号: R730.51
• 字数: 2350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-8164.2009.02.002

摘要

目的 构建针对增强绿色荧光蛋白(EGFP)的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6.方法 设计并合成针对EGFP的shRNA DNA片段,退火后连接到真核表达载体pGenesil-1上,通过测序证实载体构建成功;用脂质体将构建正确的质粒转染到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中,72h后在荧光显微镜下观察EGFP的表达.结果 测序证实针对EGFP的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6构建正确;荧光显微镜下观察转染pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6质粒的CHO细胞中,荧光明显减少.结论 针对EGFP的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6能明显干扰EGFP的表达.