携带增强型绿色荧光蛋白基因的shRNA真核表达载体的构建

• 作者: 周凤 姜晓兵 赵洪洋
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 绿色荧光蛋白 基因 U521细胞
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 2078-2080
• 页数: 3页
• 分类号: R363
• 字数: 2057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2005.10.051

摘要

目的:构建携带EGFP的shRNA真核表达载体.方法:应用PCR的方法从pBSK/U6质粒上扩增出U6启动子及其下游的Xbal、SalI和BamHI酶切位点,并增加NotI位点.将扩增的产物连入pEGFP-C1载体MluI位点处,构建成携带EGFP的siRNA真核表达载体.应用该载体介导针对EGFP的短发夹环RNA(pEGFP/U6/EGFP),转染U251细胞,通过荧光显微镜和流式细胞仪检测EGFP的表达,验证所构建载体在细胞内产生RNA干扰的效果.结果:与对照组比较pEGFP/U6/EGFP在细胞内对EGFP的抑制效果达89.8%.结论:成功构建携带EGFP的shRNA真核表达载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵洪洋	华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科	281	1224	14.0	19.0
2	周凤		13	52	3.0	7.0
3	姜晓兵	华中科技大学同济医学院附属协和医院神经外科	40	136	7.0	9.0