增强型绿色荧光蛋白原核表达载体的构建及表达

• 作者: 于声 段斯亮 苏晓庆
• 来源期刊: 广西医学
• 学科: 医学
• 关键词: 增强型绿色荧光蛋白 报告基因 表达载体 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1475-1477,封2
• 页数: 4页
• 分类号: R394.64
• 字数: 2277字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-4304.2008.10.003

摘要

目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为标记的原核表达栽体,并观察EGFP基因在大肠杆菌中的表达情况.方法 据已知的EGFP基因序列,设计引物,并引入Nde Ⅰ和Xho Ⅰ酶切位点.采用PCR技术从含有EGFP的质粒pEGFP-C1中克隆EGFP编码序列;将其亚克隆入表达载体pTWIN1,得到以EGFP为标记的原核表达载体pTWIN-EGFP.转化大肠杆菌ER2566菌株,IPTG诱导EGFP基因表达.结果 经过IPTG诱导后,细菌培养物在长波紫外线的照射下,发出明亮的绿色荧光.结论 成功构建了原核表达载体pTWIN-EGFP,为应用EGFP作为报告基因和筛选标记奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段斯亮		11	34	4.0	5.0
2	于声		4	21	3.0	4.0
3	苏晓庆		1	1	1.0	1.0