增强型绿色荧光蛋白原核表达纯化与多克隆抗体的制备

• 作者: 吴爱群 陈雪梅 高艳
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 增强型绿色荧光蛋白 抗体制备 酶联免疫吸附试验 免疫印迹 小鼠
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 345-348
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 2957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2003.03.011

摘要

目的:进行增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的克隆、原核表达和纯化以及多克隆抗体的制备,为以后纯化EGFP融合蛋白奠定基础.方法:构建pGEX-4T3-EGFP重组质粒,在大肠杆菌BL21中进行原核表达,用亲和层析法纯化GST-EGFP, 免疫 BAB/C小鼠制备EGFP多克隆抗体.结果:①目的蛋白GST-EGFP表达量为8 g/L.②获得纯抗体溶液5 ml,浓度为0.4 g/L.③EGFP抗体在1GA6FA100 000稀释度时,Western blot检测条带清晰,背景干净.结论:通过优化诱导条件,利用大肠杆菌可低成本获得大量GST-EGFP.直接使用GST-EGFP融合蛋白免疫BAB/C小鼠,可在较短时间内大量制备EGFP多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴爱群	郑州大学基础医学院人体解剖学教研室	21	116	6.0	10.0
2	高艳	郑州大学基础医学院人体解剖学教研室	20	137	7.0	11.0
3	陈雪梅	郑州大学基础医学院人体解剖学教研室	48	153	6.0	9.0