增强型绿色荧光蛋白兔多克隆抗体的制备

• 作者: 任秀花 方莉 臧卫东 闫志勇 陈雪梅
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 增强型绿色荧光蛋白 多克隆抗体 兔
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 87-89
• 页数: 3页
• 分类号: R392
• 字数: 2006字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2010.01.028

摘要

目的:制备增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的兔多克隆抗体.方法:用谷胱甘肽-增强型绿色荧光蛋白(GST-EGFP)融合抗原加福氏完全佐剂背部皮内注射首次免疫新西兰大白兔,第28天用GST-EGFP融合抗原加福氏不完全佐剂同样剂量加强免疫,第35天时再次免疫.第49天心脏采血30 mL,4℃静置过夜,收集血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗血清中EGFP多克隆抗体的效价;免疫印迹法检测EGFP多克隆抗体的特异性;利用荧光免疫细胞化学检测该抗体和观察转染EGFP贴壁生长的大鼠脑皮层混合培养细胞中EGFP的表达.结果:ELISA检测EGFP多克隆抗体滴度最高为1:9 549;免疫印迹检测结果显示该抗体特异性高;荧光免疫细胞化学检测显示存混合培养细胞中EGFP呈阳性表达.结论:直接使用GST-EGFP融合蛋白免疫新西兰大白兔,可在较短时间内制备大量EGFP多克隆抗体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	臧卫东	郑州大学基础医学院人体解剖学教研室	91	279	8.0	10.0
2	任秀花	郑州大学基础医学院人体解剖学教研室	85	343	9.0	12.0
3	方莉	郑州大学医院检验科	10	25	3.0	4.0
4	陈雪梅	郑州大学基础医学院人体解剖学教研室	48	153	6.0	9.0
5	闫志勇	郑州大学基础医学院人体解剖学教研室	10	18	3.0	3.0