弓形虫表面抗原P35重组蛋白的表达、纯化及鉴定

• 作者: 吴少庭 张仁利 林敏 高世同
• 来源期刊: 中国热带医学
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 P35融合蛋白 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2004,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 324-326
• 页数: 3页
• 分类号: R382.5
• 字数: 2196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-9727.2004.03.007

摘要

目的构建弓形虫RH株表面抗原P35基因重组表达质粒P35/pGEX-2T,并在大肠杆菌JM109中进行表达、纯化及鉴定. 方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术从弓形虫cDNA文库中扩增出编码P35抗原的基因片段,克隆入表达载体pGEX-2T,并在大肠杆菌JM109中融合表达,经GSTraPTM亲和层析柱纯化出P35重组融合蛋白,以SDS-PAGE电泳鉴定纯度、Western-blot鉴定抗原性. 结果成功构建了重组表达质粒P35/pCEX-2T,融合表达产物的分子质量约为70kDa;该蛋白抗原能为谷胱甘肽S转移酶(GST)单克隆抗体及弓形虫感染的兔血清所识别. 结论弓形虫表面抗原P35在大肠杆菌中有效表达,纯化蛋白有良好的免疫活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利		192	798	13.0	17.0
2	高世同		137	593	11.0	15.0
3	吴少庭		72	281	9.0	12.0
4	林敏		20	165	8.0	12.0