猪endoglin胞外段真核表达载体的构建及其诱导抗小鼠自身endoglin抗体的实验研究

• 作者: 张阳德 焦解歌 黎岳南
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: endoglin 肿瘤血管生成 核酸疫苗 基因治疗
• 年，卷（期）: 2004,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,8
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2004.23.001

摘要

目的分别扩增猪和小鼠endoglin胞外段cDNA,构建真核表达载体作为DNA疫苗,了解猪endoglin DNA疫苗是否能够在小鼠体内诱导产生抗小鼠endoglin的自身抗体.方法利用RT-PCR技术,从猪和小鼠胚肝中分别扩增出猪和小鼠的endoglin胞外段,用内切酶消化后分别将其插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中,经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定后,体外转染真核细胞COS-1,用RT-PCR和免疫印迹鉴定是否能正确表达.然后大量扩增和提取相应质粒,将这些质粒作为DNA疫苗,肌注免疫小鼠,通过ELISA、免疫印迹和ELISPOT测定抗自身endoglin的抗体和脾脏中分泌特异性抗endoglin抗体的B淋巴细胞.结果琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定证实RT-PCR扩增的cDNA及构建的重组真核表达质粒正确,重组的真核表达质粒能在COS-1细胞中正确表达,猪endoglin胞外段真核质粒DNA疫苗免疫小鼠可以诱导产生抗小鼠endoglin的自身抗体.结论重组猪endoglin胞外段真核表达载体可作为DNA疫苗用于抗肿瘤血管生成的基因治疗.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张阳德	中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心	556	4187	26.0	40.0
2	黎岳南	海南医学院病理学教研室	17	41	4.0	5.0
3	焦解歌	中南大学卫生部肝胆肠外科研究中心	3	5	1.0	2.0