His-猪生长激素融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化

• 作者: 姜秀英 曹广力 朱江 朱艳 李新平 沈颂东 王雪峰 贡成良 邓忠斌 马泓冰
• 来源期刊: 科技通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪生长激素基因 大肠杆菌表达 纯化 抗体IgG
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 页码范围: 63-68
• 页数: 6页
• 分类号: Q784|Q786
• 字数: 4536字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7119.2005.01.013

摘要

将通过PCR技术改建并去除了信号肽的猪生长激素cDNA克隆入大肠杆菌表达载体pET-28a(+),构建出能利用Ni-NTA Agarose柱一步纯化表达产物的重组质粒pPGH020.探讨了大肠杆菌中重组猪生长激素的最佳表达条件和纯化方法,制备并纯化了兔抗pGH抗体.SDS-PAGE和Western blot的分析结果表明,26.5 kD处有包括His·Taq、thrombin位点序列和pGH序列的融合蛋白特异条带.凝胶扫描估测猪生长激素的表达量占大肠杆菌胞浆蛋白的17.3%左右.