EGF-SEA融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化

• 作者: 孙嘉琳 朱宏丽 罗金凤
• 来源期刊: 工业微生物
• 学科: 生物学
• 关键词: EGF基因 SEA基因 融合蛋白 构建 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 31-34
• 页数: 4页
• 分类号: Q93
• 字数: 2226字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2008.04.006

摘要

根据基因库中查到的金黄色葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因序列和人体表皮生长因子(EGF)基因序列进行密码子优化,以适于大肠杆菌表达.人工合成SEA基因与EGF基因.将两目的基因克隆至原核表达栽体pFT22b中,经测序验证表明成功构建了重组表达质粒pET22b-EGF-SEA.将构建好的pET22b-EGF-SEA质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导进行表达;SDS-PAGE分析表明融合基因EGF-SEA在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体的形式得到了高效表达,产物相对分子质量约为44kDa,与理论值大小一致.包涵体经洗涤,变性、复性后用His Bind Kit进行分离纯化,所得蛋白纯度≥95%.高纯度EGF-SEA融合蛋白的获得为进一步研究其生物学活性及肿瘤治疗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱宏丽	天津科技大学生物工程学院	3	1	1.0	1.0
2	孙嘉琳	天津科技大学生物工程学院	12	10	2.0	2.0
3	罗金凤	天津科技大学生物工程学院	3	1	1.0	1.0