淀粉液化芽孢杆菌β-1,3-1,4葡聚糖酶基因的克隆和表达

• 作者: 吕文平 孙建义 李卫芬 许梓荣 韩晋辉
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: β-1,3-1,4葡聚糖酶 淀粉液化芽孢杆菌 克隆 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 263-265
• 页数: 3页
• 分类号: S852.61|Q78
• 字数: 3368字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2005.03.012

摘要

提取淀粉液化芽孢杆菌(Bacillus amylolique faciens)基因组,通过PCR克隆了该菌的β-1,3-1,4葡聚糖酶基因全长.结果显示,该基因全长843 bp,ORF为717 bp,编码239个氨基酸,计算相对分子质量为26 800,等电点为6.07.经Blast分析,该序列与基因库中的淀粉液化芽孢杆菌(M15674)同源性最高(97%).该基因已被GenBank接受(AY205562.1).用BamH Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切目的片段和表达载体pET-30a(+)后相连接,构建了重组表达载体pET-amy,并导入BL21细菌中表达,酶学特性表明:SDS-PAGE电泳在26 000左右有表达蛋白带,该工程菌总酶活这90.74 U/mL,是出发菌的3倍,最适温度在60℃左右,pH值在4～10之间.该工程菌可作为酶活高的理想材料,用以构建耐热性好和酶活高的杂合基因工程菌.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许梓荣		21	336	11.0	18.0
2	李卫芬		5	74	5.0	5.0
3	孙建义		6	62	5.0	6.0
4	吕文平		3	40	3.0	3.0
5	韩晋辉		1	16	1.0	1.0