酵母双杂交文库筛选及hTRIP15与Y盒结合蛋白-1相互作用的探讨

• 作者: 宋怀东 张新 彭永德 曲建 陈家伦 韩泽广
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: Y盒结合蛋白-1(YB-1) hTRIP15 酵母双杂交文库筛选 GST pulldown试验
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 页码范围: 15-18,42
• 页数: 5页
• 分类号: Q758
• 字数: 3588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2005.01.004

摘要

为探讨甲状腺素受体相互作用蛋白(hTRIP15)是否与其他核蛋白发生相互作用,以hTRIP15作为"诱饵",用酵母双杂交技术筛选人肝cDNA文库,在高严格度选择培养基(SD-Trp-Leu-Ade-His)上长出的克隆773个,再经β-gal表达和PCR等技术进一步缩小范围,经Blastn搜寻最终显示2个重复克隆编码一种共调节辅因子--Y盒结合蛋白-1(YB-1).将插入序列与全长YB-1比较发现进入ORF内230 bp,插入序列编码82aa,该蛋白称为YB-1-p,经蛋白体外翻译及GST-pulldown试验证实YB-1-p与hTRIP15发生相互作用.提示hTRIP15可通过与YB-1相互作用,参与调控MHCⅡ及TSH受体等甲状腺细胞重要基因表达.