人破骨细胞形成抑制因子活性域片段在大肠杆菌中的融合表达

• 作者: 张兴群 焦炳华 王梁华 袁勤生
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 关键词: 破骨细胞形成抑制因子 基因克隆 序列 表达 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 85-88
• 页数: 4页
• 字数: 3048字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-5503.2005.02.002

摘要

目的在大肠杆菌中高效融合表达人破骨细胞形成抑制因子(Osteoclastogenesis inhibitory factor,OCIF)活性域片段.方法从中国人正常肝细胞系LO2中提取总RNA,利用RT-PCR得到OCIF活性域编码基因cDNA,将其与pMD18-T连接,转化大肠杆菌K802,筛选得到阳性重组克隆载体pMD18-OCIFAD,经双酶切得到OCIF活性域编码片段,将其插入pMAL-c2载体中,转化大肠杆菌TB1.筛选得到阳性重组表达子后进行诱导表达.结果所获得的OCIF活性结构域编码序列片段经测序与GenBank报道的完全一致.所表达的产物经SDS-PAGE分析可见在相对分子质量60 000处出现一条特殊条带,与预期的相对分子质量一致.Western blot证实了表达产物能与抗人OCIF单抗发生特异性反应.结论已成功地获得了人OCIF活性结构域编码片段的克隆,并实现了其在大肠杆菌中的融合表达.表达产物对体外培养破骨细胞的骨吸收功能有明显的抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁勤生	华东理工大学国家生物反应器中心	151	1535	22.0	29.0
2	焦炳华	第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室	215	1714	20.0	33.0
3	王梁华	第二军医大学基础部生化与分子生物学教研室	77	303	9.0	12.0
4	张兴群	华东理工大学国家生物反应器中心	32	106	6.0	8.0