含有RSV G蛋白片段和CTL表位融合蛋白的表达及纯化

• 作者: 曾瑞红 梅兴国 范昌发 龚伟
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 医学
• 关键词: 呼吸道合胞病毒 糖蛋白类 CTL 表位 原核表达 蛋白纯化 聚合酶链反应 重组蛋白质类
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 120-123
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 3945字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2005.02.006

摘要

目的:构建表达呼吸道合胞病毒(RSV)G蛋白片段(G126,来自100～225氨基酸)和来自RSV M2蛋白的CTL表位的原核表达质粒,探索适宜的表达和纯化条件,获得融合表达产物,为进行体内外实验检测奠定基础.方法:利用PCR技术,从质粒pUC18(G10)、pUC18(CTL)中扩增G126和CTL基因,通过DNA重组技术构建含DsbA-G126-Linker-CTL(DsbA-GLC)融合基因的表达载体pET(GLC).转化宿主菌E.coli BL21(DE3)plysS进行诱导表达,并采用亲和层析纯化目的蛋白.结果:DsbA-GLC在E.coli BL21(DE3)plysS中可获得高效表达,表达量可达菌体总蛋白的21%.通过可溶性测试,DsbA-GLC能以可溶性形式表达.纯化后目的蛋白的纯度可达到95%以上.结论:实现RSV G126和M2蛋白CTL表位的融合表达,所获得的重组蛋白可作为抗原用于RSV重组蛋白疫苗的筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	龚伟	军事医学科学院毒物药物研究所	32	121	7.0	9.0
2	梅兴国	军事医学科学院毒物药物研究所	199	1671	19.0	29.0
3	范昌发	军事医学科学院毒物药物研究所	5	19	3.0	4.0
4	曾瑞红	军事医学科学院毒物药物研究所	9	36	4.0	5.0