弗氏链霉菌丝氨酸蛋白酶基因的克隆及表达

• 作者: 姚斌 张会图 张王照 徐玲玲 李江 石鹏君 范云六 韩晓宇
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 弗氏链霉菌 丝氨酸蛋白酶 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 酶工程
• 页码范围: 782-788
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 6855字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.05.018

摘要

从一株具有极强的降解羽毛能力的弗氏链霉菌菌株(Streptomycesfradiae var.k11)中纯化得到了一种丝氨酸蛋白酶SFP2.经蛋白测序,得到部分氨基酸序列,设计简并引物,PCR扩增得到部分基因序列,通过构建基因文库,获得了包括信号肽序列在内的完整的基因sfp2(EMBL收录号AJ784940),开放阅读框全长924bp,包括114bp的信号肽编码序列和810bp的酶原编码序列,其中成熟蛋白编码基因长576bp,编码191个氨基酸,理论分子量为19.112kD.酶原编码基因和成熟蛋白编码基因均在大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中得到了表达,酶原编码基因表达产物具有正常的生物学活性,证明了克隆基因的生物学功能.