pSLX-CMV/TβRⅡ-IgG1 Fc载体的构建

• 作者: 周永兴 张惠中 聂青和 高巍
• 来源期刊: 胃肠病学和肝病学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: TβRII-IgG1 Fc基因 肝纤维化 基因治疗 TGF-β1 逆转录病毒载体
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 230-234
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4673字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5709.2005.03.003

摘要

目的构建表达人TGF-β1Ⅱ型受体细胞外结合区和人IgG1 Fc的融合蛋白逆转录病毒载体,为进一步肝纤维化的基因治疗奠定实验基础.方法以RT-PCR方法扩增目的基因TβRII-IgG1 Fc,扩增产物纯化后克隆至测序载体pGEM-T-Easy,挑取阳性克隆酶切鉴定后测序;利用重组DNA技术,将TβRII-IgG1 Fc基因亚克隆至逆转录病毒载体pSLX-CMV中,重组质粒pSLX-CMV/TβRII-IgG1 Fc在脂质体介导下转染PA317包装细胞,G418筛选,直至出现抗性克隆,扩大培养,测定病毒滴度.结果经测序、限制性酶切分析及PCR方法鉴定,载体插入基因序列、大小、位置均正确无误,并用PA317细胞进行包装、病毒滴度测定、筛选,建立具有较高滴度的感染性重组病毒产生细胞系.结论成功构建了重组质粒pSLX-CMV/TβRII-IgG1 Fc,可望为肝纤维化的基因治疗提供有效途径.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	聂青和		4	15	2.0	3.0
2	张惠中		2	1	1.0	1.0
3	高巍		1	0	0.0	0.0
4	周永兴		1	0	0.0	0.0