hGITRaa1-165-IgG1Fc真核表达质粒的构建及其表达

• 作者: 仝佳 史烨 崔大伟 杨先知 王海生 王胜军 许化溪 邵启祥 陈君 陈建国
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体 COS-7细胞 真核表达
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 检验医学
• 页码范围: 31-34,38,封2
• 页数: 6页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3441字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2009.01.014

摘要

目的:构建含有人糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)胞外段基因的真核表达质粒hGITRaa1-165-IgG1Fc-peDNA3.1(+),检测hGITRaa1-165-IgGIFc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达.方法:以pGEMT-GITR质粒为模板,通过PCR扩增获得人GITR胞外段的基因hGITRaa1-165,将该目的基因连接至IsGlFc-pcDNA3.1(+)质粒,构建hGITRaa1-165-lgG1Fc-pcDNA3.1(+)真核表达质粒.将该重组质粒采用脂质体法转染COS-7细胞,通过SDS-PAGE和蛋白质印迹法检测hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白在真核细胞COS-7中的表达.结果:成功构建真核表达质粒hGI-TRaa1-165-IgG1Fc-pcDNA3.1(+),并在其转染的COS-7细胞培养上清中检测到hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白的表达.结论:成功表达hGITRaa1-165-IgG1Fc融合蛋白,为进一步研究GITR的生物学功能奠定了基础.