B淋巴细胞刺激因子基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 周卿 周宇荀 王锦之 马昱澍 魏东芝
• 来源期刊: 华东理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: B淋巴细胞刺激因子 大肠杆菌 克隆和表达 丝裂霉素 协同作用
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 249-252
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 2809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-3080.2005.02.029

摘要

聚合酶链式反应(PCR)扩增获得了编码BLys(134-285AA)的cDNA片段,该片段以限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ双酶切插入pET32a载体.测序表明除(ATA263→ATG263)突变并导致了氨基酸(1263M)突变外,其余序列与Genbank报道的序列一致.蛋白表达用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,SDS-PAGE表明:在33 ku处有明显的融合蛋白表达,其表达水平高达总菌体蛋白的50%.点印迹证实融合蛋白能与anti-His6Tag抗体反应.生物学活性研究表明BLys协同丝裂霉素能明显地抑制HeLa细胞的生长.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏东芝	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	158	1415	22.0	29.0
2	周宇荀	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	6	49	4.0	6.0
3	王锦之	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	3	26	1.0	3.0
4	马昱澍	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	10	26	3.0	4.0
5	周卿	华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室	1	1	1.0	1.0