人肥胖基因的克隆与原核表达载体的构建

• 作者: 刘娅 张忠芳 李鸿雁 杨丽娜 范哲 董志恒
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 肥胖基因 瘦素 原核表达 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 512-515
• 页数: 4页
• 分类号: Q786|Q785
• 字数: 3224字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2005.04.009

摘要

目的:克隆人肥胖基因瘦素蛋白(leptin)编码区cDNA序列,并构建其原核表达载体.方法:在人体脂肪组织中提取mRNA,利用RT-PCR扩增人肥胖基因,将其插入pMD18-T载体,经双酶切、鉴定后将肥胖基因片段亚克隆入pET-28a表达载体,提取质粒.将阳性重组质粒转化表达受体菌E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导肥胖基因表达产物,以聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测产物蛋白.结果:经测序证实获得的肥胖基因序列与相关文献报道一致,其表达产物的相对分子质量约为20 000.结论:利用pMD18-T克隆载体和pET-28a表达载体可以有效地在原核生物中表达重组人类瘦素蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘娅	吉林大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	52	511	12.0	20.0
2	范哲		10	57	4.0	7.0
3	李鸿雁	吉林大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	51	256	8.0	14.0
4	杨丽娜	吉林大学公共卫生学院营养与食品卫生学教研室	11	21	4.0	4.0