腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1的构建和鉴定

• 作者: 刘丹平 张正 张男 蒲勤 郭韬
• 来源期刊: 锦州医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒穿梭载体 骨形态发生蛋白2(BMP-2)
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,10
• 页数: 5页
• 分类号: R373
• 字数: 2977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-0424.2005.03.001

摘要

目的构建腺病毒穿梭质粒pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1,为构建表达具有抗原表位标记的骨形态发生蛋白2(bone morpbogenetic protein 2,BMP-2),并同时表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)报告分子的腺病毒真核细胞表达载体打下基础.方法对目的基因供体质粒pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因测序和序列内部存在的限制性内切酶识别位点进行分析,利用PCR(polymeras chain reaction,PCR)技术对pcDNA3-BMP2携带的BMP2基因突变,以去除翻译终止密码子后的基因序列并添加新的酶切识别位点Xho Ⅰ.测序检测突变情况,将突变后的BMP2基因(BMP2+基因)定向连入腺病毒穿梭质粒pShuttleCMV-IRES-hrGFP-1,通过限制性内切酶酶切图谱分析鉴定获得的重组质粒.结果重组质粒经双酶切鉴定图谱正确.结论成功构建了pShuttle CMV-BMP2+-IRES-hrGFP-1.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘丹平	锦州医学院附属第一医院骨科	21	31	3.0	4.0
2	郭韬	锦州医学院附属第一医院骨科	4	7	1.0	2.0
3	张男	锦州医学院附属第一医院骨科	5	11	2.0	3.0
4	蒲勤	第四军医大学生化教研室	25	219	8.0	14.0
5	张正	锦州医学院附属第一医院骨科	3	7	2.0	2.0