VEGF121和BMP2双基因共表达重组腺病毒载体的构建及其在HEK293中的表达

• 作者: 刘丹平 吴秀成 李媛 栗刚 王巍 钟声
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 生物学
• 关键词: 人血管内皮生长因子121 人骨形态蛋白2 腺病毒载体 质粒 基因工程
• 年，卷（期）: 2011,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-6
• 分类号: Q812
• 字数: 1916字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2011.10.002

摘要

目的 构建人血管内皮生长因子121(VEGF121)与人骨形态发生蛋白2(BMP2)双基因共表达腺病毒载体Adv-BMP2-IRES-VEGF121,并观察其在人胚肾细胞株(HEK293)中的表达情况.方法 对腺病毒质粒pShuttle-CMV-BMP2的目的基因BMP2进行PCR扩增.腺病毒质粒pShuttle-CMV-VEGF121-IRES-hrGFP-1经Kpn I/Xba I酶切后,将BMP2片段定向导入pShuttle-CMV-VEGF121-IRES,构建pShuttle-CMV-V EGF121-IRES-BMP2,并注入大肠杆菌DH5a中扩增,提取质粒.通过酶切分析、PCR检测和序列分析进行鉴定.将构建所得的质粒转染HEK293,采用RT-PCR法检测HEK293中的BMP2、VEGF121 mRNA,Western blot法检测其蛋白.结果 成功构建了Adv-BMP2-IRES-VEGF121.酶切分析及DNA序列测定证实重组质粒构建正确.质粒转染后的HEK293 BMP2和VEGF121表达阳性.结论 成功构建了Adv-BMP2-IRES-VEGF121,其转染HEK293后,VEGF121、BMP2在HEK293中共表达阳性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钟声		2	10	2.0	2.0
2	刘丹平		61	259	9.0	13.0
3	王巍		28	254	8.0	15.0
4	李媛		3	4	1.0	2.0
5	栗刚		7	20	3.0	4.0
6	吴秀成		1	3	1.0	1.0