荧光定量RT-PCR技术分析人地中海贫血β654珠蛋白基因转基因小鼠mRNA的表达

• 作者: 卢丽 邓新燕 陈系古 韦相才 马芸 黄冰
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 荧光定量RT-PCR 人地中海贫血 β654珠蛋白基因 转基因小鼠 mRNA
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 729-733
• 页数: 5页
• 分类号: R556.61
• 字数: 3846字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2005.06.001

摘要

目的采用荧光定量RT-PCR技术检测所制作的人地中海贫血β654珠蛋白基因转基因小鼠模型mRNA的表达情况,评价该技术应用于小鼠mRNA分析的价值.方法根据GenBank小鼠mRNA序列,设计用于扩增小鼠mRNA的引物和反向探针,构建荧光定量RT-PCR技术.实验分两组,分别对转基因小鼠和正常小鼠中mRNA进行检测.采用SPSS统计软件,分析和比较两组动物中mRNA的表达量及表达的稳定性.结果所检测的¨只转基因阳性小鼠中检测出人β654珠蛋白基因mRNA和小鼠内源性mRNA;而在33只正常小鼠中只检测到小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术可检测到105拷贝数的人β654珠蛋白基因mRNA和115拷贝数的小鼠内源性mRNA.荧光定量RT-PCR技术分别在F1代和F2转基因阳性小鼠中稳定地检测到,表明转基因小鼠mRNA获得稳定表达.结论所构建的荧光定量RT-PCR技术分析转基因小鼠mRNA表达具有检测定量、敏感、高效快捷的特点,该方法在鉴定和评估转基因小鼠mRNA的表达中稳定性好、定量准确,具有非常重要的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	韦相才		65	382	10.0	15.0
3	黄冰	中山大学实验动物中心	43	246	9.0	13.0
4	陈系古	中山大学实验动物中心	48	319	9.0	15.0
5	马芸	中山大学实验动物中心	25	106	6.0	9.0
8	卢丽	中山大学实验动物中心	4	39	2.0	4.0
9	邓新燕	中山大学实验动物中心	16	56	4.0	6.0