牛分枝杆菌mpb64和Ag85B融合基因在大肠埃希氏菌中的原核表达

• 作者: 刘建东 刘思国 宫强 王春来 邵美丽 郭设平
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 牛分枝杆菌 融合基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 946-949
• 页数: 4页
• 分类号: S852.618|Q786
• 字数: 3511字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.12.005

摘要

以牛分枝杆菌Vallee株基因组DNA为模板,应用PCR扩增获得mpb64和Ag85B两个目的基因片段,采用重叠延伸剪接技术(SOE)剪接mpb64和Ag85B,得到融合基因mpb64-Ag85B;将融合基因片段先克隆于pMD 18-T载体,再亚克隆到表达载体pET32a(+)中,得到重组质粒pET64-85.该重组质粒经核苷酸序列测定,显示其中的外源片段与期望的序列一致;其BL21(DE3)转化菌经IPTG诱导表达带有6个组氨酸标签的融合蛋白;用Ni2+螯合层析方法纯化融合蛋白,Western-blotting分析结果显示,该融合蛋白能与抗牛分枝杆菌阳性血清发生反应.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘思国	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	48	547	14.0	22.0
2	王春来	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	25	392	10.0	19.0
3	邵美丽	东北农业大学动物医学院	35	185	7.0	12.0
4	郭设平	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	6	98	3.0	6.0
8	宫强	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所	9	81	5.0	9.0