FADDdel-GFP真核表达载体的构建及其抗细胞毒效应初步观察

• 作者: 刘晓 张玮 徐子辉 徐芬 朱慧芬 朱晓华 杨敬 殷焦 沈关心 王国华 胡萍 虞涛 龚非力
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Fas相关结构域蛋白 凋亡 小鼠胰岛瘤细胞(NIT) 转染
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 204-207
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3200字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.03.011

摘要

目的构建融合蛋白FADDdel-GFP真核表达载体pFADDdel-GFP,用该融合基因转染小鼠胰岛瘤细胞(NIT),从而抑制死亡受体介导的细胞内凋亡信号传导,以探讨IDDM的发病机制及防治措施. 方法采用基因重组技术将FADDdel定向连接于真核表达载体pEGFP-N1,用脂质体将重组子pFADDdel-GFP导入哺乳动物细胞NIT并检测其表达,采用FACS和MTT法检测特异性T细胞对转染重组子NIT引起的细胞毒效应. 结果转染重组子pFADDdel-GFP的NIT可见绿色荧光蛋白表达;pFADDdel-GFP转染的NIT对特异性T细胞介导的细胞毒有明显抵抗. 结论成功构建pFADDdel-GFP融合基因并获稳定表达;pFADDdel-GFP转染NIT可有效抑制死亡受体介导的细胞内凋亡信号传导.