溆浦鹅卵泡抑制素α亚基编码区cDNA克隆及其原核表达

• 作者: 单雪松 吕文发 吴伟 王恒 赵静
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 抑制素 RT-PCR 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 畜牧
• 页码范围: 536-539
• 页数: 4页
• 分类号: S835.2|S814.7
• 字数: 2343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.06.004

摘要

根据GenBank中鸡卵泡抑制素α亚基序列设计引物,对该序列按大肠杆菌嗜好密码子进行优化,在设计的引物两端分别加上限制性内切酶SacⅠ和XhoⅡ的识别位点序列.利用RT-PCR技术从溆浦鹅卵泡的颗粒细胞总RNA中扩增出抑制素α亚基成熟区序列,经PCR扩增出354 bp片段,该片段与pMD18-T载体连接,转化JM109感受态细胞,所得阳性克隆进行双酶切鉴定和PCR鉴定,并进行了测序分析,得到的克隆序列与设计的序列基本一致.表明成功地获得了抑制素α亚基编码序列的克隆载体.从阳性细菌中提取质粒,经SacⅠ和XhoⅠ酶切,回收354 bp目的片段,定向克隆到pET28a中,转化DH5α受体菌,提取质粒,再转化到BL21(DE3)中,成功筛选出阳性克隆.阳性菌经IPTG诱导,通过SDS-PAGE,检测出溆浦鹅卵泡抑制素α亚基编码区的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵静	吉林农业大学动物科学技术学院	36	254	9.0	14.0
2	吴伟	吉林农业大学动物科学技术学院	46	444	11.0	19.0
3	吕文发	吉林农业大学动物科学技术学院	88	351	9.0	14.0
4	单雪松	吉林农业大学动物科学技术学院	20	80	6.0	8.0
5	王恒	吉林农业大学动物科学技术学院	16	52	5.0	6.0