应用酵母双杂交系统筛选与新基因nelin相互作用的蛋白质

• 作者: 丁金凤 刘冬青 孟宪敏 屈伸 曹慧青 王茵 王震 郭莲军
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: nelin基因 酵母双杂交 细胞骨架蛋白 蛋白-蛋白相互作用
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,9
• 页数: 5页
• 分类号: R739.63
• 字数: 4058字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2005.01.001

摘要

目的通过筛选能够与新基因nelin的心肌特异表达产物相互作用的蛋白质从而揭示nelin的生物功能.方法构建表达nelin阅读框全长的诱饵质粒并利用酵母双杂交系统筛选人心脏cDNA文库,以寻找与nelin蛋白发生相互作用的蛋白质.并利用生物信息学方法对筛选得到的蛋白质进行功能结构域分析.结果筛选得到3个蛋白质分别为肌联蛋白(Titin )N2B亚型, 细丝蛋白(Filamin )C亚型即γ-Filamin和α胰蛋白酶抑制物重链前体(inter-alpha trypsin inhibitor heavy chain precursor,ITIH).对这3种蛋白的C末端结构域进行分析发现Titin和Filamin均含有免疫球蛋白样结构域(Ig-like domain).结论实验结果揭示了新基因nelin很可能表达一个细胞骨架相关蛋白,它可通过其蛋白质的C末端同Titin和Filamin的免疫球蛋白样结构域发生相互作用而参与细胞骨架网络的形成.