HIV-1 Tat基因的融合构建及在大肠杆菌中的高效表达

• 作者: 于永利 卫红飞 林剑萍 王丽颖 王华 王玲 胡晓平
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HIV-1 Tat 伴侣10 表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 33-36
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 3315字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2005.01.009

摘要

目的: 在E.coli BL21(DE3)中高效表达Tat蛋白. 方法: 用PCR方法构建HIV-1 Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG), 以消除天然Tat蛋白的转录活性.将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同亚克隆入表达载体pET28a中, 并在E.coli中表达, 表达产物用Western blot进行鉴定. 结果: 分别通过3轮PCR, 成功地构建了Tat基因全序列.构建的重组质粒pET28a-chap10-Tat在E.coli BL21(DE3)中得到高效表达.Western blot分析表明, 在相对分子质量(Mr)为24 000处有1条特异性的带. 结论: chap10基因与 HIV-1 Tat全基因的融合构建, 使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达, 为其在爱滋病发病中作用研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王丽颖	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	82	282	9.0	13.0
2	王玲	吉林大学基础医学院免疫学教研室	92	470	12.0	17.0
3	王华	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	63	470	10.0	20.0
4	卫红飞	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	19	87	6.0	8.0
5	林剑萍	吉林大学基础医学院免疫学教研室	4	24	3.0	4.0
6	胡晓平	吉林大学基础医学院分子生物学教研室	3	10	1.0	3.0