梅山猪LH-β基因真核表达系统的构建及体内外转染表达效果的研究

• 作者: 刘世贵 吕学斌 李江凌 杨毅 武梅 王丽焕 高荣
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 LH-β基因 真核表达 转染 生殖 小鼠
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 畜牧
• 页码范围: 877-881
• 页数: 5页
• 分类号: S828.2
• 字数: 4079字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0366-6964.2005.09.004

摘要

将克隆的梅山猪LH-β基因亚克隆到真核表达型载体VR1020上,通过质粒PCR的方法在转化子中筛选阳性克隆,用BamH Ⅰ、BglⅡ双酶切鉴定重组子.得到的重组真核表达质粒转染Cos7细胞株,RT-PCR检测猪LH-β表达情况.然后用VPLH-β质粒、VR1020分别肌肉注射小鼠,研究了小鼠的生殖特性情况.结果显示:通过质粒PCR和双酶切分析,得到猪LH-β基因以正确方向插入的重组真核表达质粒VPLH-β.重组质粒VPLH-β经脂质体介导转染Cos7细胞,培养不同时间后提取mRNA进行RT-PCR,发现转染细胞RNA中含有与LH-β基因对应的mRNA;结果表明已成功构建了PLH-β的真核表达质粒,能正确转录表达LH-β.动物试验结果显示PLH-β免疫小鼠后的各项指标均高于对照处理.克隆构建的猪VPLH-β质粒能发挥明显的生殖生理调节作用,可较好地促进雌性动物的排卵、怀孕和正常产仔.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘世贵	四川大学生命科学学院	115	1963	26.0	37.0
2	吕学斌		91	378	10.0	15.0
3	高荣	四川大学生命科学学院	33	426	11.0	19.0
4	杨毅	四川大学生命科学学院	121	269	7.0	9.0
5	李江凌		29	77	4.0	6.0
6	武梅	四川大学生命科学学院	5	34	3.0	5.0
7	王丽焕	四川大学生命科学学院	4	20	3.0	4.0