CD80-IgG融合蛋白的表达、纯化与鉴定

• 作者: 何伟 冯献启 刘凌波 刘芳 张敏 邹萍
• 来源期刊: 华中科技大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 融合基因 免疫亲和层析 CD80抗原
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 420-423
• 页数: 4页
• 分类号: R733.71
• 字数: 4253字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-0741.2005.04.012

摘要

目的构建CD80-IgG融合基因表达载体,表达并纯化该融合蛋白,初步探讨其增强抗肿瘤免疫的作用.方法将小鼠CD80分子胞外段和IgG Fc段cDNA串联起来,定向克隆入质粒pcDNA3.0中,使其在哺乳动物细胞中表达.采用免疫亲和层析法纯化,免疫印迹和斑点ELISA鉴定表达的融合蛋白,流式细胞术、MTT法检测其增强白血病细胞CD80分子表达及促进T细胞增殖的功能.结果DNA测序证明两段基因正确插入质粒载体;亲和层析纯化得到浓度为0.1 mg/ml,纯度为95%的蛋白质溶液;免疫印迹、ELISA表明该蛋白质即为CD80-IgG融合蛋白;流式细胞术证明其能够提高白血病细胞表面CD80分子的表达.结论成功构建融合基因表达载体,表达并纯化出融合蛋白,该蛋白可增强CD80分子的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹萍	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	258	977	13.0	18.0
2	刘芳	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	157	1393	20.0	30.0
3	张敏	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	197	1492	20.0	32.0
4	刘凌波	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	45	92	6.0	8.0
5	何伟	广州医学院附属第一医院肿瘤血液中心	6	6	2.0	2.0
6	冯献启	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	4	14	2.0	3.0