重组弓形虫GRA8的表达及其诱导的免疫应答

• 作者: 余新炳 吴少庭 张仁利 袁仕善 高世同 黄达娜
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 致密颗粒蛋白 GRA8 纯化 免疫应答
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 991-994
• 页数: 4页
• 分类号: R382.5
• 字数: 3122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.11.016

摘要

目的表达和纯化弓形虫RH株GRA8的截短型片段,分析其诱导的免疫应答.方法从重组克隆pMD18-GRA8中切取GRA8的插入片段,亚克隆至原核表达质粒pET-23a(+)中,转化大肠杆菌BL21,PCR和酶切鉴定转化菌落的插入序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达;大量诱导表达GRA8,金属螯合层析予以纯化,将纯化蛋白免疫小鼠,观察其诱导的免疫应答.结果 GRA8基因的特异片段被亚克隆到原核表达质粒pET-23a(+),在大肠杆菌中未见GRA8的明显表达;表达的蛋白经金属螯合层析获得纯化;纯化蛋白能被弓形虫感染兔血清识别.结论成功构建了GRA8的原核重组表达质粒,纯化的蛋白具有良好的抗原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳		201	1352	17.0	28.0
2	张仁利		192	798	13.0	17.0
3	高世同		137	593	11.0	15.0
4	黄达娜		134	499	10.0	13.0
5	吴少庭		72	281	9.0	12.0