稳定表达野生型和突变型DNA聚合酶β的NIH3 T3细胞系的建立及其生长特性

• 作者: 吴景兰 杨洪艳 董子明 赵勤 赵国强 赵继敏 郑智敏 金戈 黄幼田
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: DNA聚合酶β NIH3T3细胞系 细胞转染
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 819-822
• 页数: 4页
• 分类号: Q756
• 字数: 2932字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2005.05.008

摘要

目的:建立稳定表达野生型及突变型DNA聚合酶β(polβ)的NIH3T3细胞系.方法:用脂质体转染法分别将野生型和突变型polβ真核表达载体pcDNA3.1-PW和pcDNA3.1-PM3转染入NIH3T3细胞,经G418筛选得到稳定转染细胞系.用RT-PCR、免疫印迹法检测转染细胞polβ mRNA和POLB蛋白的表达水平,MTT法测转染细胞生长曲线,免疫组化法测增殖细胞核抗原(PCNA),并用流式细胞仪测细胞周期.结果与结论:成功建立了稳定表达野生型及突变型polβ的NIH3T3细胞系.野生型polβ对NIH3T3细胞生长无明显影响,突变型polβ则使NIH3T3细胞生长速度加快,细胞周期发生改变,细胞多被阻滞在S期.