人胰激肽释放酶基因的克隆及融合蛋白的表达

• 作者: 孙文学 彭武建 戴勇 李体远 杜珙 黄瑞芳
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 激肽释放酶 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2005,（16）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 2405-2409
• 页数: 5页
• 分类号: Q785
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2005.16.002

摘要

目的开发激肽释放酶基因工程产品,为开展基因治疗高血压奠定基础.方法提取人胰腺组织总RNA,逆转录后PCR扩增激肽释放酶cDNA.回收、补平后插入质粒KS,构建出中间载体KSKK,酶切鉴定后双向测序分析激肽释放酶基因序列.从KSKK中切出激肽释放酶原及激肽释放酶基因,插入真核表达载体PET-28b(+),经酶切鉴定后,进行核苷酸序列分析和融合蛋白表达.结果本实验克隆的激肽释放酶基因与GenBank报告的激肽释放酶基因相比,有一个碱基不同,同源性为99.8%.将IPTG诱导表达进行SDS-PAGE电泳,与蛋白标准品比较在31800处可见明显的高表达带.免疫印迹实验表明重组蛋白具有KK的抗原性.结论已成功克隆并表达了人组织激肽释放酶基因,为进一步开发基因工程产品及进行基因治疗高血压研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭武建		5	115	3.0	5.0